上海遠(yuǎn)慕生物代理銷售美國(guó)Omega品牌系列產(chǎn)品，包含有：質(zhì)粒小量提取試劑盒I型，型號(hào)包含：Plasmid Mini Kit I(100)，Plasmid Mini Kit I(200)，Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column，質(zhì)粒小量提取試劑盒II型，質(zhì)粒中量提取試劑盒，質(zhì)粒大量提取試劑盒，快速過濾超大量質(zhì)粒提取試劑盒，其他系列提取試劑盒，耗材，溶液等，了解更多更詳細(xì)的Omega產(chǎn)品請(qǐng)來電我司銷售人員，我們將竭誠(chéng)為您解答每一個(gè)問題。
名稱：質(zhì)粒小量提取試劑盒I型
品牌：Omega
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
系列：質(zhì)粒小量提取試劑盒
型號(hào)：Plasmid Mini Kit I(100)
貨號(hào)：D6943-01
用途：從小于5ml培養(yǎng)過夜的細(xì)菌培養(yǎng)液中純化約35ug質(zhì)粒DNA
質(zhì)粒小量提取試劑盒特性與優(yōu)點(diǎn)：
安全-無酚lvfang等危險(xiǎn)的有機(jī)物抽提
簡(jiǎn)單-硅膠柱過濾操作
快速-在30分鐘內(nèi)完成多個(gè)樣品的抽提工作
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質(zhì)粒小量提取試劑盒I型,Plasmid Mini Kit I(100)操作步驟:
1、取1-5ml細(xì)菌培養(yǎng)物，12000rpm離心1min，盡量吸除上清（菌液較多時(shí)可以通過多次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中）。
2、向留有菌體沉淀的離心管中加入250ul溶液Ⅰ(請(qǐng)先檢查是否已加入RNaseA），使用移液器或旋渦振蕩器*懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀。注意：如果菌塊未*混勻，會(huì)影響裂解導(dǎo)致質(zhì)粒提取量和純度偏低。
3、向離心管中加入250ul溶液Ⅱ，溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體讓其裂解。注意：混勻一定要溫和，以免污染細(xì)菌基因組DNA，此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠，作用時(shí)間不要超過5min，以免質(zhì)粒受到破壞。
4、向離心管中加入350ul溶液Ⅲ，立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次，充分混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12000rpm離心10min，用移液器小心地將上清轉(zhuǎn)移到另一個(gè)干凈的離心管中，盡量不要吸出沉淀。注意：溶液Ⅲ加入后應(yīng)立即混合，避免產(chǎn)生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀，可再次離心后取上清。
5、將上一步所得上清液加入吸附柱中（吸附柱加入收集管中），室溫放置2min，12000rpm離心1min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水yichun)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
8、12000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。
9、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置2min，12000rpm離心1min。
10、為了增加質(zhì)粒的回收效率，可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm離心1min。
質(zhì)粒小量提取試劑盒I型注意事項(xiàng):
1.使用前請(qǐng)先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現(xiàn)混濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復(fù)澄清后再使用。溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后應(yīng)立即擰緊蓋子。
2.洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50ul，體積過小影響回收效率;洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影晌，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率，DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。
3.如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10kb的大質(zhì)粒，應(yīng)加大菌體使用量，使用5-10ml過夜培養(yǎng)物，同時(shí)按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脫時(shí)可以適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)時(shí)間，以增加提取效率。
標(biāo)簽：質(zhì)粒小量提取試劑盒I型 Plasmid Mini Kit I(100) 質(zhì)粒小量提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒
