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中文名：Hoechst33258染色液(1mg/ml)
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：1ml
分類：細(xì)胞染色
保存：—20℃,避光,12個月
用途：細(xì)胞凋亡檢測，普通細(xì)胞核染色，常規(guī)的DNA染色。
說明：Hoechst33258染色中l(wèi)eagene公司推薦采用該試劑；Hoechst33258是一種熒光染料，可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對細(xì)胞的毒性較低；染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測，可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
Hoechst33258染色液(1mg/ml)
Hoechst33258染色液(1mg/ml)操作步驟：
1、固定的組織細(xì)胞染色
a.對于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑；隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst33258染色；如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst33258染色。
b.對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258工作液，覆蓋住樣品即可；對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積的工作液，混勻；室溫放置3-5分鐘。
c.吸除Hoechst33258染色液，用TBST，PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察；細(xì)胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
2、活細(xì)胞染色
a.根據(jù)實驗具體要求，用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度，即為Hoechst33258染色工作液；細(xì)胞核染色時，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml。
b.取96，24，6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài)；按96孔板加入100μl，24孔板加入500μl，6孔板加入1ml的比例，加入適當(dāng)?shù)腍oechst33258染色液，染液必須充分覆蓋細(xì)胞。
c.在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)。
d,輕輕吸除Hoechst33258染色液。
e.用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次。
f.進(jìn)行熒光檢測。
Hoechst33258染色液(1mg/ml)注意事項：
1、Leagene Hoechst33258染色液(1mg/ml)應(yīng)稀釋至合適的濃度后使用。
2、熒光染料都存在淬滅的問題，為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑；建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測，活細(xì)胞或組織染色后應(yīng)立即觀察。
3、避免反復(fù)凍融，否則容易失效。
4、Hoechst33258對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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標(biāo)簽：Hoechst33258染色液(1mg/ml)
