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Q-瓊脂糖凝膠HP使用方法_用途_注意事項_參數(shù)說明
點擊次數(shù):3518 更新時間:2018-03-07

Q-瓊脂糖凝膠HP是將季銨基團鍵合在瓊脂糖微球上形成的一種強陰離子交換介質(zhì);有關(guān)Q-瓊脂糖凝膠HP的使用方法,參數(shù)說明等咨訊由上海遠慕生物提供,本司是家專業(yè)從事實驗試劑的供應商,咨詢更多試劑!

 

Q-瓊脂糖凝膠HP參數(shù)說明

中文名:Q-瓊脂糖凝膠HP

英文名:Q Sepharose HP

供應商:上海遠慕

規(guī)格:100ml、500ml

顆粒大小:34μm 

凝膠類型:離子交換填料,強堿型

基質(zhì):6% 交聯(lián)瓊脂糖凝膠

性狀:白色微球,凝膠狀,保存在20%酒精溶液中。

應用:利用離子交換作用,應用于蛋白等生物分子的精細純化等。

Q-瓊脂糖凝膠HP使用方法_參數(shù)說明_用途

Q-瓊脂糖凝膠HP

 

Q-瓊脂糖凝膠HP使用方法

1、乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干。

2、無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹。

3、鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時,間隙攪拌,濾干,水洗只中性。

4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。

5、上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6、凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應當盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5:1即可。

7、洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

 

Q-瓊脂糖凝膠HP注意事項

1、密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥的地方,不能冷凍;用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。

2、在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。

3、在實驗過程中,請嚴格遵循產(chǎn)品說明書上的要求進行操作。

 

Q-瓊脂糖凝膠HP用途

1、可用氫氧化鈉在位清洗;基質(zhì)的親水特性保證在洗脫過程中減少細胞衍生雜質(zhì)的非特異性吸附。

2、可用于蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

 

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