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羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF操作步驟
點擊次數(shù):1562 更新時間:2018-03-09

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羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF參數(shù)說明

中文名:羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF

英文名:CM Sepharose FF

供應(yīng)商:上海遠慕

規(guī)格:100ml、500ml

凝膠類型:離子交換填料,弱酸型

結(jié)構(gòu)成分:6%交聯(lián)瓊脂糖

粒徑: 45-165μm

配基基團:carboxymethyl(羧甲基)

總離子交換量:0.09-0.13mmol/g凝膠

工作PH值:6-10

操作溫度:4-40℃

性狀(以下信息僅供參考):含20%乙醇,底部為乳白色膠體。

用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)適用于各種帶陽性電荷生物大分子的濃縮純化等。

保存:2~8℃

羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF操作步驟

羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF

 

羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF操作步驟

1、裝柱

凝膠過濾介質(zhì)的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。

以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。

選擇一根一定直徑的柱子,長約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。不要劇烈攪動,以免攪壞微球。

將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無氣泡。用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。

打開蠕動泵,讓緩沖液緩慢流過,使柱床穩(wěn)定。用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。

2、平衡

讓緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。

3、上樣

樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,再上樣。介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。

4、洗脫

用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。

5、再生

一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。

6、注意

在裝柱、使用和保存柱子的時候,始終要避免柱子流干氣泡進入。

 

羧甲基-瓊脂糖凝膠 FF操作注意事項

1、密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥的地方,不能冷凍;用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。

2、在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。

3、在實驗過程中,請嚴格遵循產(chǎn)品說明書上的要求進行操作。

4、本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸;避免長時間暴露在空氣中。

5、保質(zhì)期:5年。

 

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