關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)有哪些影響因素呢？我們一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質(zhì)量、反轉(zhuǎn)錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴(kuò)增長度等問題，但很少有人會(huì)想到耗材的選擇，可能也會(huì)影響您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

我們一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質(zhì)量、反轉(zhuǎn)錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴(kuò)增長度等問題，但很少有人會(huì)想到耗材的選擇，可能也會(huì)影響您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。那么關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)耗材我們改如何選擇呢？

首-先需要明確的是我們做的是哪種PCR實(shí)驗(yàn)。根據(jù)檢測方法的不同，PCR實(shí)驗(yàn)分為普通PCR法和熒光定量PCR法，前者一般是終點(diǎn)PCR跑膠法測定，所以在選擇耗材時(shí)需要關(guān)注的主要是耗材本身的導(dǎo)熱性和密封性；而后者是實(shí)時(shí)檢測熒光信號(hào)，除了導(dǎo)熱性和密封性外，對(duì)透光性和避光性也有所要求。換句話而言，可以做熒光定量PCR的耗材一定可以來做普通PCR，反之，效果卻會(huì)差很多！

確定好了實(shí)驗(yàn)類型，我們就可以選擇耗材了，如前面所述，我們知道了密封性、導(dǎo)熱性、透光性、避光性等因素是我們需要關(guān)注的，那為什么要關(guān)注這些呢？

一、密封性
密封性越好，產(chǎn)物的揮發(fā)越少，得到的產(chǎn)物就越多同時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生也越少，對(duì)于下一輪實(shí)驗(yàn)的污染也就越少，也就意味著假陽性的產(chǎn)生率越低。

二、導(dǎo)熱性
導(dǎo)熱性越好越均一，PCR的速度就越快，準(zhǔn)確度也越高。

三、透光性
這主要是對(duì)于熒光定量而言，我們知道它是一種實(shí)時(shí)定量的方式，那么耗材本身的透光性就直接關(guān)系到我們檢測到的熒光信號(hào)多少，如果選擇耗材透光性不足，本該檢測到的信號(hào)檢測不到，那就會(huì)造成我們對(duì)結(jié)果的誤判。

四、避光性
這也是針對(duì)熒光定量而言的，同上面的因素，如果我們?cè)谡麄€(gè)實(shí)驗(yàn)過程中沒注意避光，帶有熒光的試劑過度被消耗，那直接就會(huì)影響我們實(shí)驗(yàn)的擴(kuò)增效率，導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果產(chǎn)生。