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新生牛血清蛋白檢測(cè)指標(biāo)有哪些?
點(diǎn)擊次數(shù):546 更新時(shí)間:2022-06-01

新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。經(jīng)大規(guī)?;旌虾蟪^濾制成成品,主要用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),是醫(yī)藥生物技術(shù)產(chǎn)品的重要原材料之一,其質(zhì)量好壞直接影響細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

總蛋白含量是新生牛血清需要檢查的指標(biāo)。它屬于化學(xué)成分的初步分析。有人統(tǒng)計(jì)過國(guó)產(chǎn)新生牛血清的蛋白含量1,在比較各產(chǎn)區(qū)各年份后,發(fā)現(xiàn)其含量在3.7%~4.4%之間。進(jìn)口新生牛血清并不與之*一致。因?yàn)閲?guó)內(nèi)的血清常采自奶牛,而國(guó)外的血清常采自肉牛。蛋白質(zhì)是新生牛血清的主要成分,在細(xì)胞培養(yǎng)中起著維持滲透壓、pH 值緩沖、物質(zhì)運(yùn)輸和提供營(yíng)養(yǎng)、促進(jìn)細(xì)胞粘附等重要作用。在胎牛血清中,其總蛋白含量要更低。

血紅蛋白含量也是新生牛血清一項(xiàng)重要檢測(cè)指標(biāo)。它是在血清運(yùn)輸和加工過程中細(xì)胞裂解釋放到血清中的。之所以檢測(cè)主要是由于牛血清中血紅蛋白具有氧化性,其含量過高會(huì)引起羧基的產(chǎn)生和脂質(zhì)過氧化反應(yīng),從而導(dǎo)致生產(chǎn)細(xì)胞受損,也會(huì)增加下游純化處理的難度,給藥品質(zhì)量帶來安全隱患2。有報(bào)道血紅蛋白具有神經(jīng)毒性。

牛血清白蛋白.jpg

使用時(shí)常見問題及解決方法:

一、保存血清-好的方法?

血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

二、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

三、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

1.解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

2.解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生

3.請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。

4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。

5.若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。

四、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?


欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。

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