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重點(diǎn)分析:實(shí)驗(yàn)試劑應(yīng)用的常見(jiàn)問(wèn)題
點(diǎn)擊次數(shù):511 更新時(shí)間:2022-06-02

 

 

  1. 測(cè)定范圍

  每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性范圍,樣品結(jié)果若超過(guò)此范圍,分析儀將顯示結(jié)果超過(guò)范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì),應(yīng)更換合格試劑。

  2. 底物耗盡

  使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法、兩點(diǎn)法測(cè)定酶活性時(shí),若酶活性非常高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會(huì)超過(guò)某一吸光度變化范圍,監(jiān)測(cè)期的吸光度將偏離線性,使測(cè)定結(jié)果不可靠。

  3. 試劑空白

  每種試劑都有一定的空白吸光度范圍,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì)。而試劑空白吸光度限值,常作為程序參數(shù)輸入儀器,如經(jīng)核查超限,儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,提示更換試劑。需要指出的是,還原型輔酶I (或II)等投料量不足或劣質(zhì)的原料,往往需要加大用量,才使“表觀"吸光度上升,湊合過(guò)試劑空白核對(duì)的“關(guān)",其后果為如下情況:

 ?、?線性范圍變窄現(xiàn)象:高值測(cè)不高??赡芤?yàn)椋篴.生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量不足;b.試劑成份穩(wěn)定性較差。

 ?、?靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降,測(cè)定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。可能因?yàn)樵噭┑孜餄舛炔蛔恪?br/>
 ?、?低值偏高現(xiàn)象:試劑空白的變化曲線(吸光度VS時(shí)間)明顯波動(dòng)??赡芤?yàn)樵噭┳陨聿环€(wěn)定,自行分解;工具酶純度不夠,雜酶含量超限,導(dǎo)致干擾作用。

  4. 樣品信息

  樣品的溶血、脂血、黃疸等會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此,應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的檢測(cè)模式,并在結(jié)果計(jì)算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。

 

 

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