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一抗和二抗的定義、作用與選擇
點(diǎn)擊次數(shù):157 更新時(shí)間:2025-02-27

‌一抗和二抗的種屬來(lái)源通常是一樣的‌。在選擇二抗時(shí),通常需要根據(jù)一抗的種屬來(lái)源來(lái)選擇相應(yīng)的二抗。例如,如果一抗是小鼠源的單克隆抗體,那么二抗應(yīng)選擇抗小鼠的二抗(如山羊抗小鼠或兔抗小鼠)。‌

一抗和二抗的定義和作用

‌一抗(primary antibody)‌:是一種免疫球蛋白,能夠特異性結(jié)合特定的蛋白,并將其純化、檢測(cè)和定量。一抗可以是多克隆抗體(pAb)或單克隆抗體(mAb),分別由多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生或由單一B淋巴細(xì)胞分泌產(chǎn)生。

‌二抗(secondary antibody)‌:直接與靶抗原連接的一抗結(jié)合,通常用于標(biāo)記和檢測(cè)一抗。二抗可以是完整抗體或抗體片段,如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。

選擇二抗時(shí)需要考慮的因素

‌一抗的種屬來(lái)源‌:二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來(lái)源。例如,如果一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(如山羊抗小鼠或兔抗小鼠)。

‌一抗的類別和亞類‌:二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體;單克隆抗體由于存在不同的亞型,選擇二抗時(shí)需要根據(jù)一抗的類型或亞類相匹配。

‌實(shí)驗(yàn)類型‌:不同的實(shí)驗(yàn)類型可能需要不同類型的二抗。例如,在雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)中,如果兩個(gè)一抗分別來(lái)自不同的種屬,則二抗應(yīng)選擇來(lái)自第三種種屬的抗體,以避免交叉反應(yīng)。

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