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菌落總數(shù)平板計(jì)數(shù)原則與計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵
點(diǎn)擊次數(shù):123 更新時(shí)間:2025-04-02

  菌落總數(shù)平板計(jì)數(shù)原則:

  1、無(wú)菌操作:操作中必須有“無(wú)菌操作"的概念,所用玻璃器皿必須是完w全滅菌的,不得殘留有細(xì)菌或抑菌物質(zhì)。所用剪刀、鑷子等器具也必須進(jìn)行消毒處理。樣品如果有包裝,應(yīng)用75%乙醇在包裝開(kāi)口處擦拭后取樣。

  操作應(yīng)當(dāng)在超凈工作臺(tái)或經(jīng)過(guò)消毒處理的無(wú)菌室進(jìn)行。瓊脂平板在工作臺(tái)暴露15分鐘,每個(gè)平板不得超過(guò)15個(gè)菌落。

  2、采樣的代表性:如系固體樣品,取樣時(shí)不應(yīng)集中一點(diǎn),宜多采幾個(gè)部位。固體樣品必須經(jīng)過(guò)均質(zhì)或研磨,液體樣品須經(jīng)過(guò)振搖,以獲得均勻稀釋液。

  3、樣品稀釋誤差:為減少樣品稀釋誤差,在連續(xù)遞次稀釋時(shí),每一稀釋液應(yīng)充分振搖,使其均勻,同時(shí)每一稀釋度應(yīng)更換一支吸管。

  在進(jìn)行連續(xù)稀釋時(shí),應(yīng)將吸管內(nèi)液體沿管壁流入,勿使吸管尖j端伸入稀釋液內(nèi),以免吸管外部粘附的檢液溶于其內(nèi)。

  為減少稀釋誤差,SN標(biāo)準(zhǔn)采用取10mL稀釋液,注入90mL緩沖液中。

  菌落平板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性關(guān)鍵

  一、平板劃線分離法由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料,在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線,微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并逐步分散開(kāi)來(lái),如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,可在平板表面得到單菌落。

  二、稀釋倒平板法先將待分離的材料用無(wú)菌水作一系列的稀釋(如一∶一0、一∶一00、一∶一000、一∶一0000…),然后分別取不同稀釋液少許,與已溶化并冷卻至四5℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后,傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中,待瓊脂凝固后,制成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出出菌落。如果稀釋得當(dāng),在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落,這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落,或重復(fù)以上操作數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)。

  稀釋涂布法:優(yōu)點(diǎn):可以計(jì)數(shù),可以觀察菌落特征。缺點(diǎn):吸收量較少,較麻煩,平板不干燥效果不好,容易蔓延。一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計(jì)數(shù)??!

  稀釋混合平板法:優(yōu)點(diǎn):可以計(jì)數(shù),吸收量為一ml,較方便。優(yōu)點(diǎn):不能觀察菌落特征。一般用于菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)??!平板劃線法:優(yōu)點(diǎn):可以觀察菌落特征,對(duì)混合菌進(jìn)行分離!!缺點(diǎn):不能計(jì)

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